Centrifugación: qué es, cómo equilibrar el rotor y cuándo usarla

La centrifugación es una técnica de separación que, mediante la rotación a alta velocidad, acelera la sedimentación de sólidos suspendidos o la separación de líquidos con distinta densidad. El componente más denso forma un pellet en el fondo del tubo; el menos denso queda como sobrenadante cerca de la boca.

¿Qué es la centrifugación?

Los tubos se alojan en un rotor (de mesa, de pie, microhematocrito, ultracentrífuga…). Deben colocarse de forma simétrica y con la misma masa para evitar vibraciones que dañen el eje. Existen tubos de 1–25 mL (p. ej., Eppendorf) en vidrio o polímeros resistentes según el disolvente.

¿Cuándo usar centrifugación (y no filtración)?

• Partículas muy finas que atraviesan el papel de filtro.
• Matrices viscosas o con bajo volumen (microescala).
• Separación célula/sobrenadante, precipitados finos, emulsiones inestables.

Si el objetivo es un líquido limpio con mínima manipulación, valora filtración por gravedad. Para recuperar sólidos de forma rápida, considera filtración a vacío.

Materiales

• Centrífuga (de mesa o microcentrífuga) con rotor compatible.
• Tubos compatibles (material/volumen) y tapas.
• Balance para igualar masa (o pipeta para igualar volumen).
• Tacos/adaptadores para tubos pequeños en rotores grandes.

Procedimiento paso a paso

1. Planifica la RCF requerida (p. ej., 1000–3000 g para precipitados finos). Si tu equipo solo muestra rpm, conviértelas:

   RCF (g) = 1.118×10−5 · r(mm) · rpm2

   r = radio efectivo desde el eje al fondo del tubo.

2. Llena/ajusta los tubos: mismo volumen y masa para cada par opuesto.
3. Equilibra el rotor: coloca tubos en posiciones opuestas. Si tienes impares, prepara un tubo dummy con disolvente para compensar.
4. Cierra cada tubo y limpia gotas externas.
5. Configura tiempo y RCF/rpm; baja la tapa hasta el cierre.
6. Finalizado el ciclo, espera a parada completa, abre, retira sin agitar y procesa pellet/sobrenadante.

Seguridad y buenas prácticas

• EPI: gafas, bata, guantes. Trabaja en campana con disolventes volátiles.
• Compatibilidad química del tubo (muchos orgánicos atacan PS/PP estándar).
• No centrifugues tubos agrietados o sobrellenados.
• Ante vibración anómala: aborta el ciclo y reequilibra.

Errores frecuentes

• Usar rpm sin considerar el radio → RCF incorrecta.
• Desequilibrio de masas → vibración, riesgo mecánico.
• Tubos mal cerrados → fugas/contaminación del rotor.
• Recuperar el pellet agitando el tubo → resuspensión indeseada.

Referencias

• Isac-García, J.; Dobado, J. A.; Calvo-Flores, F. G.; Martínez-García, H. (2015). Experimental Organic Chemistry Laboratory Manual. Elsevier. ISBN 978-0-12-803893-2